服務簡介

穩(wěn)定細胞株構建是指將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上,載體被轉染到宿主細胞并整合到宿主染色體中,用載體中所含的抗性標志進行篩選。常用的真核表達載體的抗性篩選標志物有新霉素、潮霉素和嘌呤霉素,常用G418來代替新霉素進行選擇性篩選,篩選得到可穩(wěn)定表達目的蛋白,或者穩(wěn)定表達沉默特定基因的細胞株。穩(wěn)定細胞株的構建周期長、難度大,每一步都很關鍵,尤其是細胞轉染,常用物理方法(電轉)、化學方法(脂質體等)、生物方法(病毒),根據不同的實驗條件,選擇方法,來達到實驗目的。
穩(wěn)定細胞株構建的基本原理是用基因導入工具或基因編輯工具,改造原始細胞基因組,使改造后的細胞具有某些特定表型,并經過抗性篩選或其他篩選方法,使其表型能長期傳代穩(wěn)轉。
百歐泰建立了一套成熟穩(wěn)定的細胞體系構建系統(tǒng),可針對多種不同細胞(包括難轉染細胞)為您提供生產型穩(wěn)定細胞株的構建服務。具備成熟的細胞實驗服務平臺,服務內容豐富詳細。同時還可為客戶提供包括過表達、沉默穩(wěn)轉細胞系構建等多種技術服務。我們能夠按照客戶的要求完成目的生產型細胞系的構建和測試。
服務步驟

應用范圍
1 藥物研發(fā)
2 開發(fā)靶向于癌癥干細胞的治療性藥物
細胞轉染
1 陽離子脂質體轉染法
特點:操作簡便、適用于各種裸露的DNA和RNA片段、適合轉染各種的細胞、對DNA濃度有一定要求、對細胞有一定的毒性。瞬時轉染、穩(wěn)定轉染均可
2 電穿孔法
特點:適用性廣,適用于質粒和幾十kb的基因組片段、針對不同細胞要優(yōu)化實驗條件、細胞致死率較高。瞬時轉染、穩(wěn)定轉染均可
3 逆轉錄病毒轉染
特點:轉染效率高,適用于難轉染細胞轉染、利用病毒介導轉染,外源基因整合較穩(wěn)定、逆轉錄病毒只選擇感染分裂細胞、容納外源基因長度<8kb。穩(wěn)定轉染特定細胞
4 腺病毒轉染
特點:可用于難轉染的細胞,需考慮安全因素。瞬時轉染、穩(wěn)定轉染均可
5 磷酸鈣法
特點:不適用于原代細胞、所需的DNA濃度較高、操作簡便但重復性差。瞬時轉染、穩(wěn)定轉染均可
6 顯微注射法
特點:轉染細胞數有限,多用于工程改造或轉基因動物的胚胎細胞。瞬時轉染、穩(wěn)定轉染均可
服務優(yōu)勢
百歐泰團隊具有豐富的細胞系構建經驗,可提供多種服務優(yōu)勢:
l 保證極高的成功率與快速交付速度;
l 服務為主:價格合理,可根據客戶需求綜合分析,為客戶提供滿意的結果;
l 專業(yè)的技術支持,保障強力、周到及時的售前售后服務支持,隨時為您解答出現(xiàn)的任何問題;
l 完整的上下游服務:具備完善的細胞、抗體、蛋白等服務平臺,一站式技術服務,節(jié)約客戶寶貴時間和經費。
l 多種不同啟動子和標簽的慢病毒表達載體可供選擇;
l 細胞來源清晰,質量有保證:無細菌、真菌和支原體污染;
服務流程
雙方溝通一致后確定實驗方案,確定服務要求-簽訂合同—預付款-開始實驗-成果交付
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